HPLC液相色譜儀是實(shí)驗(yàn)室里非常精密的“心臟”,想要它長(zhǎng)期穩(wěn)定輸出準(zhǔn)確數(shù)據(jù),日常的“體檢”和“保養(yǎng)”絕對(duì)不能馬虎。這里為你整理了一份實(shí)用的維護(hù)與排故指南,涵蓋了核心部件的常見問(wèn)題與處理方案。
一、 色譜柱:分離的核心
色譜柱是儀器中最昂貴的耗材之一,也是最容易出現(xiàn)問(wèn)題的部位。
1. 日常維護(hù)與保養(yǎng)
樣品預(yù)處理:進(jìn)樣前務(wù)必過(guò)濾或離心,防止微小顆粒堵塞柱頭篩板。建議加裝保護(hù)柱,攔截雜質(zhì),延長(zhǎng)分析柱壽命。
溶劑過(guò)渡:使用含緩沖鹽的流動(dòng)相后,必須先用水沖洗,再用有機(jī)溶劑保存,避免鹽析出損傷填料。
pH值控制:對(duì)于反相C18柱,流動(dòng)相pH應(yīng)控制在2-8之間,避免強(qiáng)酸強(qiáng)堿腐蝕硅膠基質(zhì)。
長(zhǎng)期保存:反相柱建議保存在純甲醇或乙腈中,正相柱用正己烷封存,并密封兩端堵頭。
2. 常見故障與排除
柱壓升高:通常是填料堵塞或柱頭污染。可嘗試反向沖洗(需確認(rèn)廠家允許),或清洗/更換柱頭篩板。
峰形拖尾/畸變:可能是柱效下降、樣品過(guò)載或硅羥基殘留吸附。可嘗試用甲醇-二氯甲烷梯度再生,或向流動(dòng)相中加入掃尾劑(如三乙胺)。
保留時(shí)間漂移:多由溫度波動(dòng)或流動(dòng)相比例變化引起。檢查柱溫箱穩(wěn)定性,并確保流動(dòng)相配比準(zhǔn)確。

二、 輸液泵:系統(tǒng)的動(dòng)力源
泵的穩(wěn)定性直接決定了基線的平穩(wěn)。
1. 日常維護(hù)與保養(yǎng)
流動(dòng)相處理:所有流動(dòng)相需經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾并脫氣,防止氣泡和顆粒進(jìn)入泵頭。
定期更換耗材:泵密封圈屬于易損件,建議每3-6個(gè)月預(yù)防性更換;溶劑入口濾頭每月檢查,堵塞則清洗或更換。
結(jié)束沖洗:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,若使用過(guò)緩沖鹽,必須先用純水沖洗系統(tǒng)30分鐘以上,再用甲醇沖洗保存。
2. 常見故障與排除
壓力過(guò)高:通常是系統(tǒng)堵塞。先斷開色譜柱用兩通連接,若壓力恢復(fù),說(shuō)明柱堵;若仍高,檢查在線過(guò)濾器或管路。
壓力過(guò)低/無(wú)壓力:多為漏液或氣泡。檢查泵頭、接頭是否濕潤(rùn);執(zhí)行Purge排氣操作;檢查流動(dòng)相是否耗盡。
壓力波動(dòng)大:常見原因是泵內(nèi)有氣泡或單向閥污染。進(jìn)行系統(tǒng)排氣,或拆下單向閥用異丙醇超聲清洗(注意安裝方向)。
三、 檢測(cè)器:信號(hào)的捕捉者
以常用的紫外(UV)和熒光檢測(cè)器為例。
1. 日常維護(hù)與保養(yǎng)
光源管理:紫外檢測(cè)器的氘燈壽命約1000-2000小時(shí),能量衰減至70%時(shí)需更換;熒光檢測(cè)器若為L(zhǎng)ED光源(如盛瀚AIC80),壽命較長(zhǎng)且維護(hù)成本低。
流通池清潔:每次測(cè)試后用甲醇-水沖洗流通池。若出現(xiàn)污染,可用異丙醇或10%稀硝酸超聲清洗。
2. 常見故障與排除
基線噪音大/波動(dòng):可能是流通池污染、有氣泡或燈能量不足。清洗流通池、排除氣泡或更換光源。
基線漂移:檢查溫度是否穩(wěn)定(特別是示差檢測(cè)器),或流動(dòng)相是否未充分平衡。
靈敏度下降:確認(rèn)檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置正確,檢查樣品是否匹配,或檢測(cè)器是否受污染。
四、 管路系統(tǒng):連接的脈絡(luò)
管路連接看似簡(jiǎn)單,卻是漏液和堵塞的高發(fā)區(qū)。
1. 日常維護(hù)與保養(yǎng)
防堵塞:確保所有溶劑和樣品均經(jīng)過(guò)濾,防止微粒進(jìn)入系統(tǒng)。定期更換在線過(guò)濾器濾芯。
防鹽析:切換流動(dòng)相時(shí),注意緩沖鹽與高比例有機(jī)相混合易產(chǎn)生沉淀,需平穩(wěn)過(guò)渡。
2. 常見故障與排除
漏液:檢查所有管路接頭(特別是泵頭和進(jìn)樣閥)。使用專用工具切割平整管路切口,接頭遵循“手緊后再加1/4圈”原則,避免過(guò)緊損壞螺紋。
堵塞:若排查非泵和柱的問(wèn)題,可能是管路或混合器堵塞。可嘗試反沖管路,或用稀硝酸超聲清洗(視材質(zhì)而定)。
五、 模塊化系統(tǒng)的維護(hù)便利(參考盛瀚 Dandelion)
對(duì)于模塊化設(shè)計(jì)的系統(tǒng)(如Dandelion HPLC/UHPLC),維護(hù)變得更加直觀:
前部直入式設(shè)計(jì):無(wú)需拆卸整個(gè)模塊,可直接在前部維護(hù)泵頭、進(jìn)樣閥等部件,新手也能快速上手。
靈活配置:泵頭支持5ml/10ml/50ml互換,方便在UHPLC、HPLC和PreHPLC之間切換,日常檢查時(shí)可根據(jù)當(dāng)前配置針對(duì)性排查。
做好這些細(xì)節(jié),不僅能減少儀器“罷工”的頻率,還能大大延長(zhǎng)設(shè)備的使用壽命。如果在維護(hù)中遇到不確定的問(wèn)題,參考廠家手冊(cè)或及時(shí)聯(lián)系工程師總是最穩(wěn)妥的選擇。